advancedbiomatrix膠原酶簡(jiǎn)介

產(chǎn)品描述

膠原酶由多種酶組成，包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶，旨在有效水解膠原蛋白和解離組織。已經(jīng)評(píng)估了各種膠原酶產(chǎn)品專門用于 Advanced BioMatrix 的膠原蛋白產(chǎn)品。該產(chǎn)品用于提高消化膠原凝膠中分離細(xì)胞的活力和功能。

膠原酶以 50 mg 包裝大小的凍干無菌粉末形式提供。重構(gòu)后，產(chǎn)品即可使用。

1. 使用這些建議作為指導(dǎo)來確定適合您的培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳凝膠解離程序。

2. 在磷酸鹽緩沖鹽水或其他 pH 中性介質(zhì)中重構(gòu)凍干膠原酶粉末（50 毫克）。可以使用 1 mg/ml 的典型濃度。

3. 從膠原凝膠中吸出培養(yǎng)基。

4. 用預(yù)熱的 PBS 或其他 pH 中性培養(yǎng)基清洗膠原凝膠 2X，以去除可能抑制膠原降解的培養(yǎng)基。

5. 加入適量的膠原酶溶液（一個(gè)凝膠體積就足夠了）。例如：對(duì)于含有 0.5 ml 凝膠的 24 孔板，添加 0.5 ml 膠原酶溶液。

6. 轉(zhuǎn)移到 37oC 培養(yǎng)箱中 30-60 分鐘。為了促進(jìn)膠原凝膠的更快解離，凝膠和膠原酶溶液可以使用大口徑移液器吸頭上下移液。

7. 如有必要，在 37°C 下再孵育 30-60 分鐘，以完成凝膠的消化。如果需要，每 15 分鐘移取一次凝膠/細(xì)胞混合物。注意：較厚的凝膠或含有較高濃度細(xì)胞的凝膠可能需要更多時(shí)間。

8. 凝膠*消化后，向凝膠/細(xì)胞混合物中加入等體積的*培養(yǎng)基，然后收集細(xì)胞。

9. 沖洗收集任何殘留細(xì)胞的培養(yǎng)容器。

10. 在室溫下以 250 xg 離心細(xì)胞懸液 5 分鐘。

11. 小心吸出上清液，將細(xì)胞沉淀重懸于 0.5 -1 ml 新鮮培養(yǎng)基中。

12. 使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器和臺(tái)盼藍(lán)確定細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力。